濕熱蒸氣滅菌驗證如下。
①熱電偶校驗。用油浴、標準溫度計、加熱器等校驗熱電偶溫標的準確度，其誤差應在士0.5℃以內才能使用。
②測量箱、阱內部的溫度場，找出其最冷點的位置。試驗時測溫熱電偶不得少于10個，將其分布在箱、阱內具有代表性的表面上可能的最冷點和滅菌最困難的位置，滅菌控制器的時間應調節到確保所有安裝點的溫度在121℃以上最少維持15min。因為這是國際公認的標準。按所設定的滅菌溫度（≥121℃）和滅菌時間（≥15min）連續滅菌3次。用試驗所得的數據進行統計分析。找出凍干箱內最冷點的位置，保溫階段至冷卻開始時，最冷點溫度和腔室平均溫度間的差值不應大于士2.5℃。
③生物指示劑挑戰試驗。一般可用5個以上的耐熱板，每1cm2板上培養10‘個耐熱桿菌孢子作生物指示劑，放置于箱、阱內的擱板上或壁面上可能的最冷點處。經121℃保溫30min滅菌，而后按中國藥典“無菌檢查法”作無菌檢查。若呈陰性，則確認滅菌完全；若呈陽性，則蒂查找滅菌不完全的原因。調整滅菌程序，延長滅菌時間，重新驗證。
④驗證在滅菌的全過程中，箱、阱內是維持正壓的，因為不允許外界非無菌空氣進人滅菌腔室危及其無菌。在箱、阱排水時，排水管向外界的閥門是打開的，應防止有外界空氣流人。
⑤驗證滅菌腔室的附件、儀表、密封材料對高溫高壓滅菌的適應性。醫藥凍干機箱、阱及箱內金屬件，一般采用不銹鋼制造。
不銹鋼的腐蝕大多數情況下是由于在熱濕環境下氯離子對不銹鋼材料的晶間腐蝕，特別是含氯化物溶液，在高溫高壓熱濕環境中，不銹鋼表面鈍化膜將被腐蝕。00Cr17Ni14Mo2（美國牌號316L）
不銹鋼具有較強的抗晶間腐蝕能力，而0Crl8Ni9（304）則較差。
有關零部件材質的性能，是用查驗供應商提供的關于這些材料的材質檢驗報告來驗證的。
箱、阱的門、窗密封，壓塞系統、連接閥門等的密封對高溫蒸氣的耐受能力是由查驗密封材料的材質性能和現場檢漏來驗證的。
⑥保護裝置的可靠性。濕熱蒸氣滅菌是一種壓力容器操作，必須設計和裝備一系列安全保護裝置，驗收時應查驗其動作的可靠性。
a.箱門未鎖定，滅菌蒸氣進氣閥門應打不開。
b.箱內壓力超過環境壓力，箱門的鎖定裝置應打不開。
c.箱內壓力超過第一設定值（如0.11MPa），進蒸氣閥門應關閉，并發出聲光報警。
d.箱內壓力超過第二設定值（如0.13MPa），進蒸氣閥門應再次關閉，并有聲、光報警。
e，箱內壓力達到第三設定值（如0,18MPa），機械式安全閥門打開放氣。
